L’Isthmine-1, une protéine podocytaire impliquée dans le syndrome néphrotique expérimental

Introduction A partir d’une etude transcriptomique differentielle de rein de rats hypertendus et nephrotiques, nous avons identifie et etudie, pour la premiere fois, l’Isthmine-1 (ISM-1), une molecule impliquee dans le syndrome nephrotique (SN). Resultats L’immunohistochimie montre que l’ISM-1 est exprimee physiologiquement dans le rein chez le rat, la souris et chez l’homme. Son expression est podocytaire en microscopie electronique, confirmee par une co-localisation avec la nephrine. Puisque ses deux recepteurs : l’integrine alphaV beta5 et GRP78 (Bip) sont connus pour etre impliques respectivement dans la permeabilite vasculaire et dans des glomerulopathies, nous avons etudie l’ISM-1 au cours de 2 modeles experimentaux de SN chez le rat par l’injection de puromycine d’aminonucleoside (PAN) et d’adriamycine (ADR). Dans ces 2 modeles, nous avons observe une augmentation du taux d’ARNm d’ISM-1 ainsi que de ses recepteurs dans les glomerules isoles, contrastant avec la diminution de l’expression de la nephrine. Afin de demontrer l’implication de l’ISM-1 dans le SN, nous avons inhibe son expression par l’administration d’antisens anti-ISM-1 a des rats nephrotiques PAN et ADR. Chez les rats PAN, l’inhibition de l’ISM-1 ne modifie pas l’evolution de la maladie probablement par une severite importante du modele. Nous poursuivons l’investigation des rats ADR dont le developpement de la maladie est plus progressif. En parallele, nous avons incube des podocytes humains en culture avec des doses croissantes d’ISM-1 recombinante et observe une diminution de la viabilite cellulaire. Cette baisse de la viabilite des podocytes s’accompagne d’une inhibition de l’autophagie visible par l’accumulation de la proteine P62 et d’une induction de la caspase 8 active, proteine impliquee dans l’apoptose. L’immuno-precipitation de GRP78 et de l’integrine avb5 a partir des glomerules nous a permis de confirmer l’interaction de l’ISM-1 et avec ses recepteurs dans le rein. Discussion Nous developpons actuellement des vecteurs viraux qui seront injectes a la souris pour induire une forte expression d’ISM-1. Nous attendons que ces souris developpent une maladie glomerulaire. Conclusion Nos resultats montrent pour la premiere fois que l’ISM-1 a une expression physiologique podocytaire. Son expression et celle de ses recepteurs sont augmentees au cours des syndromes nephrotiques experimentaux. In vitro, L’ISM-1 semble avoir un role deletere sur les podocytes par inhibition de l’autophagie.