Méfions-nous du NGS : attention aux faux-sens des incidentalomes génétiques des mutations NR3C1

L’avenement des nouvelles technologies d’analyses genetiques comme le Next Generation Sequencing (NGS), a augmente considerablement la decouverte fortuite d’anomalies ou incidentalomes genetiques. Six mutations heterozygotes faux-sens du recepteur aux glucocorticoides, hGR (code par le gene NR3C1 ), ont ete identifiees dans le cadre de recherche d’anomalies pour des pathologies gonadiques. Le GR est un recepteur nucleaire, facteur de transcription hormono-induit, implique dans de nombreux processus physiologiques. Neanmoins, la signification pathogenique des mutations reste obscure. L’objectif de ce travail etait de caracteriser ces mutations afin d’evaluer leur impact fonctionnel sur la signalisation. Les six mutations originales de NR3C1  localisees dans l’exon 2 conduisent a une substitution d’un acide amine du domaine N-terminal du GR (F65 V, M86 V, A229 T, A304E, N374S, R386Q), mais excluant le domaine t1 d’activation fonctionnel, siege potentiel d’interaction fonctionnelle avec des coregulateurs transcriptionnels. La cotransfection transitoire, dans des cellules HEK293 T, de vecteurs d’expression de GR mute et d’un gene rapporteur luciferase a permis d’etablir des courbes dose-reponse de la dexamethasone et a exclu toute anomalie de transactivation des GR mutes (EC 50  ≈ 0,2 nM, Bmax identique au GR sauvage), sans modification de la potentialisation du coactivateur transcriptionel SRC1. Enfin, l’expression proteique des GR mutes en Western Blot n’est pas non plus modifiee ni leur translocation cytonucleaire etudiee par immunohistochimie. Ces resultats soulignent le caractere silencieux de ces mutations faux-sens du GR et invitent a interpreter avec prudence la decouverte d’incidentalomes genetiques par NGS en l’absence de caracterisation detaillee afin d’evaluer de facon pertinente leur impact fonctionnel sur une signalisation particuliere.