缓释rhVEGF的PDLLA/nHA复合多孔支架制备及血管诱导活性研究

目的研究制备消旋聚乳酸/纳米羟基磷灰石(PDLLA/nHA)多孔支架复合并缓释重组人血管内皮细胞生长因子(rhVEGF165),并观察其诱导血管形成的生物特性,为进一步实验提供理论依据。方法将rhVEGF165与PDLLA溶液物理混匀,用冷冻相诱导分离法制备PDLLA/nHA复合多孔支架,制成直径3 mm、高8～10 mm圆柱状支架。电镜观察其结构特点,检测在缓释rhVEGF的PDLLA/nHA支架降解过程中rhVEGF释放量,绘制释放曲线。分离培养兔骨髓间充质干细胞(BMSC),接种于复合和未复合rhVEGF的PDLLA/nHA支架。将细胞支架复合物植入兔大腿肌袋中,4周后取出材料行vWF免疫组化染色,观察新生血管形成情况。结果每个缓释rhVEGF的PDLLA/nHA支架含rhVEGF 4μg,材料孔径为20～100μm,孔隙率约90%,孔径联通性好。免疫组化及新生血管密度检测显示缓释rhVEGF支架+BMSC(rhVEGF-PDLLA/nHA+BMSC,VPB组)新生血管密度较空白支架(PDLLA/nHA,P组)之差异非常显著(P<0.001),较空白支架+BMSC(PDLLA/nHA+BMSC,PB组)之差异显著(P<0.05)。结论缓释rhVEGF的PDLLA/nHA多孔支架的结构特点适合细胞生长,有较强的血管诱导活性,是血管化组织工程的理想材料。