Caractérisation des lymphocytes Tγδ en contexte de mélanome

Introduction Le melanome est une tumeur se servant d’un detournement immunologique pour se developper. Les lymphocytes Tγδ (LTγδ) sont des cellules de l’immunite au cœur du processus immunitaire et sont presents en nombre significatif dans les tumor infiltrating lymphocytes (TIL) de melanome. Ces cellules sont peu etudiees dans le melanome mais elles paraissent etre un point-cle de la comprehension du mecanisme d’echappement immunitaire mis en place par le melanome. Materiel et methodes Nous avons analyse le phenotype et la fonction des LTγδ issus de PBMC ou de metastases tumorales (TIL) de patients atteints de melanome par rapport a des LTγδ issus de PBMC ou tissu lymphoide de donneurs sains. Nous avons etudie a l’etat basal la presence de marqueurs d’activation, de co-stimulation, du panel KIR, de differentiation et de l’etat regulateur. Apres stimulation des LTγδ purifies avec des phosphoantigenes (IPP, HMB-PP) et PMAiono, nous avons analyse l’ up-regulation des molecules d’activation, la secretion de cytokines et nous avons etudie l’activite cytotoxique des LTγδ sur des lignees de melanomes. Resultats A l’etat basal, les LTγδ emanant de TIL ont un profil regulateur plus important et expriment moins le CD56. En ce qui concerne les marqueurs d’activation, le CD69 et le CD25 etaient surexprimes dans les echantillons TIL par rapport aux donneurs sains. Au sein du panel KIR, le NKG2A et le NKP44 etaient surexprimes au sein du groupe TIL par rapport aux PBMC. Parmi les marqueurs de co-stimulation, les TIL surexpriment 41BB et ICOS. Apres stimulation avec des phosphoantigenes et PMAiono, nous avons observe une moins bonne reponse aux differents activateurs des LTγδ isoles de PBMC et TIL de patients par rapport aux donneurs sains (CD69 et CD25). En termes de cytotoxicite, un profil tres variable est observe au sein des LTγδ provenant de TIL, que nous allons correler aux donnees cliniques des differents patients. Enfin, nous avons mis en evidence un defaut de secretion cytokinique des LTγδ isoles des patients pour trois cytokines du panel teste : Granzyme B, Interferon Gamma et TNF alpha. Discussion Ces resultats demontrent des alterations phenotypiques et fonctionnelles majeures des LTγδ en contexte de melanome en comparaison avec les LTγδ de donneurs sains et mettent en exergue une variabilite phenotypique, fonctionnelle et de secretion de cytokines au sein des LTγδ provenant de metastases tumorales. Les analyses de correlation entre ces parametres immunologiques et les parametres cliniques des patients sont en cours et pourraient permettre l’identification de nouveaux marqueurs pronostiques d’evolution clinique. Conclusion Les LTγδ sont modules en contexte de melanome. Un retablissement des fonctions de ces lymphocytes pourrait etre un nouvel axe de recherche pour enrichir l’arsenal therapeutique voue a combattre le melanome.