CB 23. Perfil fenotípico e capacidade migratória de células dendríticas após fagocitose de células apoptóticas

Introducao: Durante um processo infeccioso, neutrofilos recrutados para o local da infeccao fagocitam o microrganismo e, apos entrarem em processo de apoptose, tornam-se celulas apoptoticas infectadas (CA infectadas). Celulas dendriticas (CD) sao uma das principais celulas envolvidas na eliminacao dessas CA infectadas. Nos e outros grupos temos demonstrado que a fagocitose de CA infectadas por CD promove a producao de citocinas como TGF-β, IL-6 e IL-23 e, portanto, o microambiente necessario para a geracao de celulas Th17. Por outro lado, a fagocitose de CA estereis promove a producao de mediadores anti-inflamatorios como TGF-β, IL-10 e PGE2 que favorece, in vitro, a diferenciacao de celulas Treg. Objetivo: O objetivo desse trabalho foi avaliar se a fagocitose por CD de CA estereis ou CA infectadas poderia interferir na maturacao e na capacidade migratoria destas CD na presenca de quimiocinas que sabidamente sao produzidas, in vivo, nos linfonodos. Metodologia: CD, derivadas da medula ossea de camundongos C57BL/6, foram co-cultivadas com CA estereis ou CA infectadas com E. coli (proporcao 1:3), durante 18h. Como fonte de CA infectadas, celulas Raw foram cultivadas com E. coli na proporcao 1:10, incubadas por 2h e submetidas a radiacao UVC (0,35 J). Como fonte de CA estereis, celulas Raw foram submetidas a mesma intensidade de radiacao. O ensaio de migracao de CD foi realizado utilizando placas de transwell na presenca de quimiocinas CCL19/CCL21. Apos 6h de incubacao, o numero de celulas que migraram mediante ao gradiente quimiotatico e o fenotipo de maturacao destas CD foram avaliados por citometria de fluxo. Resultados e Discussao: CD cultivadas com CA infectadas apresentaram uma maior porcentagem de maturacao, expressando altos niveis de CD86+, MHC-II+ e CCR-7+, (45,7%) e alta taxa de migracao na presenca de CCL19/CCL21 (654 CD migratorias), quando comparado com CD incubadas apenas com meio (346 celulas migratorias). Alem disso, a incubacao de CD com CA infectadas promoveu a sintese de TGF-β, IL-6, IL-23 e PGE2. Entretanto, apenas 7,09% das DC co-cultivadas na presenca de CA estereis apresentaram um fenotipo de maturacao, CD86+, MHC-II+ e CCR-7+, quando comparado com CD incubadas com meio (5,32%). Alem disso, um numero menor de celulas foi capaz de migrar na presenca de quimiocinas (516 celulas migratorias), quando comparado a migracao observada por CD cultivadas com CA infectadas. Por outro lado, CD cultivadas na presenca de CA estereis resultam na producao de baixos niveis de IL-6, IL-23 e PGE2. Conclusao: Os resultados aqui apresentados demonstram a capacidade de modulacao do sistema imunologico por diferentes celulas apoptoticas (infectadas ou nao infectadas), visto que CA infectadas promoveram uma maior maturacao de celulas dendriticas, que tiveram uma maior capacidade migratoria, quando comparadas com CD que fagocitaram CA sem estarem infectadas, cujo fenotipo permaneceu imaturo.