Thérapie cellulaire de l’infertilité masculine : caractérisation des cellules souches germinales

But de l’etude Dans les pays industrialises, on estime qu’un couple sur six consulte pour des problemes de fertilite. L’etat actuel des connaissances chez l’animal permet d’envisager le developpement de techniques de therapie cellulaire utilisant les cellules souches germinales (CSG), qui assurent le maintien de la spermatogenese dans le testicule, dans le but de restaurer une fertilite apres transplantation testiculaire. Notre projet vise a caracteriser les CSG humaines. Methodes Des suspensions cellulaires preparees a partir de biopsies testiculaires humaines ont ete analysees par cytometrie en flux a l’aide du fluorochrome specifique de l’ADN Vybrant pour le marqueur side population (SP) et des marqueurs α6 integrine, Thy-1, et β-2 microglobuline. Pour l’etude fonctionnelle des CSG humaines, nous avons developpe un test in vivo apres transplantation des cellules dans les testicules de souris immunodeficientes ‹‹ humanisees ›› NSG, permettant d’observer un debut de colonisation des tubules seminiferes murins par les CSG humaines. Resultats Ces marqueurs permettent de definir differentes sous-populations germinales, dont une sous-population SPα6 + Thy-1 + β2M qui contient les progeniteurs spermatogoniaux les plus immatures. Le test de fonctionnalite apres transplantation montre que les CSG sont presentes dans la sous-population cellulaire SPα6 + Thy-1 + β2 M − . D’autre part, differentes conditions de culture in vitro ont ete testees et permettent la culture des cellules souches ‹‹ spermatogonies immatures ›› sur une periode de 21 jours. Conclusion Nous avons ainsi developpe une methode permettant d’etudier la differenciation germinale au cours de la spermatogenese adulte humaine, et de purifier une population hautement enrichie en GSG.