二氢杨梅素对人肺腺癌细胞增殖和凋亡的影响及其机制探讨

目的:研究二氢杨梅素(dihydromyricetin)对人肺腺癌NCI-H1975细胞增殖和凋亡的影响,并初步探讨其可能的分子作用机制.方法:采用CCK-8法检测不同浓度(10、25、50、75和100 μmol/L)的二氢杨梅素分别作用不同时间(12、24和48 h)对人肺腺癌NCI-H1975细胞增殖的抑制作用.FCM法检测不同浓度(25、50和100 μmol/L)的二氢杨梅素作用24 h对肺腺癌NCI-H1975细胞凋亡及细胞周期的影响,同时在倒置相差显微镜下观察NCI-H1975细胞的形态学变化.采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法分别检测不同浓度(25、50和100 μmol/L)的二氢杨梅素作用肺腺癌NCI-H1975细胞24 h后Bcl-2、Bax和Bad等基因的表达水平变化.结果:二氢杨梅素对人肺腺癌NCI-H1975细胞增殖有明显的抑制作用(P＜0.05),且存在时效和量效关系(P值均＜0.05).二氢杨梅素能显著促进肺癌细胞的凋亡(P＜0.01),但不诱导细胞周期阻滞(P＞0.05).二氢杨梅素作用后NCI-H1975细胞中Bcl-2 mRNA及其蛋白表达显著下调(P值均＜ 0.05),而Bax mRNA及其蛋白表达显著升高(P值均＜0.05);二氢杨梅素作用后Bad mRNA及其蛋白表达无明显变化(P值均＞0.05),但Bad蛋白的磷酸化水平显著上调(P＜0.05).结论:二氢杨梅素可以通过调控线粒体凋亡途径中Bcl-2蛋白家族的表达,介导人肺癌细胞的生长抑制,提示二氢杨梅素可能是一种有效治疗肺癌的潜在药物.