我国猪群中H9N2亚型毒株HA和NA基因特性的研究

目的了解我国内地从猪中分离到H9N2亚型毒株HA和NA基因来源及它们使猪致病的原因.方法用PCR扩增目的基因,与PGEM-TEasy Vector 4℃过夜连接,重组质粒转化DH-10β细菌,筛选阳性菌落,酶切鉴定,测序.然后,进行进化树分析.结果两株猪H9N2毒株HA蛋白分子上第226位上氨基酸为L,这与从人和猪所分离出的H9N2毒株相同,其连接肽属对禽致病的毒株,但它们的序列为R-L-S-R,而不是R-S-S-R;其NA蛋白茎区第62～64位存在掉失,这与A/Shaoguan/408/98,A/Swine/Hong Kong/9/98及A/Duck/Hong Kong/y 280/97(H9N2)毒株相同;HA与NA基因进化树分析表明,两株猪H9N2毒株的HA基因接近于A/Chicken/Hong Kong/G23/97和A/Chicken/Hong Kong/G9/97,而NA基因接近于A/Shaoguan/408/98毒株.结论两株猪H9N2亚型毒株的HA和NA基因可能性最大来自禽H9N2毒株.由于其HA蛋白分子上连接肽氨基酸序列发生替换,可能造成了它们对猪具有致病性.禽H9N2毒株NA蛋白茎区氨基酸掉失,造成了它们能直接感染猪.