干扰ROR1基因表达可抑制骨肉瘤MG-63细胞的上皮-间质转化

目的:探讨干扰受体酪氨酸激酶样孤核受体1 (receptor tyrosine kinase-like orphan receptor 1,ROR1)基因表达对骨肉瘤MG-63细胞上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响.方法:将特异性靶向ROR1基因的siRNA(即ROR1-siRNA)转染至ROR1相对高表达的骨肉瘤MG-63细胞中,蛋白质印迹法检测ROR1基因表达下调情况.然后采用划痕愈合实验及Transwell小室法检测MG-63细胞迁移和侵袭能力的变化,倒置光学显微镜下观察细胞形态的变化.最后,采用蛋白质印迹法和免疫荧光染色法检测MG-63细胞中EMT相关蛋白E-钙黏蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(vimentin)以及肿瘤转移相关蛋白锌指E盒结合同源盒蛋白1 (zinc finger E-box binding homeobox protein 1,ZEB1)、基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)和MMP-9的表达情况.结果:转染ROR1-siRNA可明显下调骨肉瘤MG-63细胞中ROR1蛋白的表达水平(P＜0.05).下调ROR1基因表达后,MG-63细胞的迁移和侵袭能力均明显降低(P值均＜ 0.05),细胞形态由间质细胞形向上皮细胞形转变,E-cadherin表达水平明显上调(P＜0.05),而vimentin表达水平明显下调(P＜0.05),另外ZEB1、MMP-2和MMP-9的表达水平均明显降低(P值均＜ 0.05).结论:RNA干扰ROR1基因表达可通过抑制EMT的发生,降低骨肉瘤MG-63细胞的迁移和侵袭能力.