Influence of epidermal growth factor (EGF) supplementation at different times of in vitro maturation of canine oocytes

O objetivo deste estudo foi avaliar a influencia do fator de crescimento epidermal (EGF) em diferentes momentos da maturacao in vitro de oocitos caninos. Os ovarios foram coletados de 55 cadelas consideradas sadias e isolados assepticamente, imersos em solucao fisiologica e transportados refrigerados. Os complexos cumulus -oocito (COCs) grau 1 foram selecionados e divididos em dois grupos, denominados grupo controle (GC) e grupo tratamento (GT). No GC, 698 COCs grau I foram cultivados em placas de quatro pocos contendo meio TCM-199 suplementado com 25 mM de HEPES, 100 UI/mL de penicilina, 100 mg/mL de estreptomicina, 26 mM de bicarbonato de sodio, 1,5 mM de piruvato de sodio, 2,9 mM de lactato de sodio penta hidratado, 0,6 mM de cisteina, 0,03 UI/mL de hCG, 0,5 µg/mL de FSH, 20 µg/mL de estrogeno em estufa umida a 38oC, 5% de CO 2 nos periodos de 24h, 48 h e 72 h . Ja no GT, 547 COCs receberam o mesmo meio de maturacao acrescido de 10 ηg/mL do EGF. Modelos de regressao logistica foram elaborados para estimar as chances do oocito ser observado nos estagios de maturacao nuclear em diferentes tempos de cultivo. Com base nos resultados encontrados, o meio suplementado com EGF demonstrou 2,56 vezes mais chances de ter um oocito no estagio de metafase I (M-I) do que o meio sem EGF (p u003c 0,0001). Os resultados desse estudo demonstraram tambem que o tempo de 72 h mostrou 5,88 vezes mais chances de ter um oocito no estagio de metafase II (M-II) do que o tempo de 2 h (p = 0,0001) e 7,69 vezes mais chance do que o tempo de 48h (p = 0,0001). As chances de se encontrar um oocito em M-II tambem foram 9,09 vezes maiores no meio suplementado com EGF do que no meio sem EGF (p = 0,0001). Dessa forma, estes resultados demonstraram a importância essencial do EGF em diferentes momentos da maturacao oocitaria, sendo componente chave para a aquisicao da competencia meiotica nas cadelas, aumentando os indices de M-I e M-II.