微RNA-34a在乳腺癌中的表达及其基因启动子甲基化

目的:探讨人乳腺癌组织中微RNA-34a(microRNA-34a,miR-34a)的表达及其临床意义,并分析miR-34a基因启动子甲基化状态与成熟miR-34a表达及患者生存的相关性.方法:采用TaqMan探针-实时荧光定量PCR法检测93例乳腺癌组织及5例良性乳腺疾病标本(作为对照)中成熟miR-34a的表达.运用EpiTect Fast FFPE Bisulfite试剂盒对石蜡包埋乳腺癌组织的基因组DNA进行抽提及亚硫酸盐修饰,然后采用甲基化特异性PCR法检测miR-34a基因启动子的甲基化状态.统计学分析miR-34a基因启动子甲基化状态与miR-34a表达量之间的关系,并用生存曲线分析其预后意义.结果:乳腺癌组织中成熟miR-34a的表达水平比良性对照组明显降低(P=0.006).miR-34a表达水平与肿瘤大小(r=-0.312,P=0.021)、淋巴结转移(r=-0.378,P=0.004)和肿瘤分级(r=-0.341,P=0.011)均呈负相关性,而与雌激素受体(estrogen receptor,ER)、孕激素受体(progesterone receptor,PR)和人表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor-2,HER-2)等水平均不相关(P均＞0.05).miR-34a基因启动子非甲基化组的成熟miR-34a表达水平明显高于甲基化阳性单一模式组和甲基化阳性混合模式组(P值均＜ 0.001).与非甲基化组和甲基化阳性混合模式组相比,miR-34a基因甲基化阳性组的乳腺癌患者无复发生存期(P＜0.001,P=0.019)及总生存期(P=0.002,P＜0.001)均明显缩短.结论:在部分乳腺癌患者中,miR-34a基因甲基化可导致miR-34a表达下调.miR-34a基因的甲基化状态与乳腺癌的复发及不良预后相关.