一例罕见B(A)血型的基因鉴定

目的 对1例血清学血型鉴定困难的患者进行基因鉴定,分析引起血型鉴定困难的原因及突变基因.方法 采用微柱凝胶法和试管法进行血清学血型鉴定、抗球蛋白试验和抗体筛查,采用聚合酶链反应(PCR)扩增结合测序及PCR产物克隆的方法,分析该患者ABO基因第6、7外显子区及其侧翼序列,寻找变异位点.结果 患者血清学血型鉴定正反结果不一致,其红细胞与单克隆抗A抗体反应呈弱阳性(++),与单克隆抗B及抗H抗体反应均为强阳性(++++);其血清与A1型红细胞呈现弱凝集,但不凝集B和0型红细胞;患者直接及间接抗球蛋白试验均为阴性、血清抗体筛查为阴性.经测序发现,患者ABO基因存在多个变异,其第6外显子区存在261 del和c.297A＞G二处杂合变异,第7外显子区存在c.526C＞G、c.640A＞G、c.646T＞A、c.657C＞T、c.681G＞A、c.703G＞A、c.771C ＞T、c.796C＞T、c.803G＞C、c.829G＞A、c.930G＞A共11处杂合变异,以A101等位基因为标准序列进行比较,对照Blood Group Antigen Gene Mutation Database进行ABO等位基因突变分析,判断患者血型为B(A)04/006血型.结论 患者的B变异的基因型及弱AB的表型是引起血型鉴定正反不一致的主要原因,DNA基因分型有助于解决疑难样本的血型鉴定.