HIV-1 CRF07_BC gp41重组抗原在不同体系表达效率的比较

目的 获得HIV-1 CRF07_BC株gp41重组抗原表达效率最佳的体系.方法 采用基因工程技术将gp41重组蛋白基因分别构建到pThioHisA,pThioHis A-1(不含标签),PBV220,PGEX-6p-1原核表达载体.转化大肠杆菌BL21和Rosetta两种宿主菌,通过IPTG诱导表达并经WB鉴定.结果 4种原核表达质粒构建完成,蛋白成功表达.PGEX-6p-1表达量明显高于pThioHis A载体;而无标签载体组中,PBV220表达量优于pThioHis A-1.BL21和Rosetta宿主菌对表达体系无影响.结论 HIV-1 CRF07_BC株gp41重组抗原在大肠杆菌中以包涵体形式存在,构建在PGEX-6p-1和PBV220载体上gp41重组蛋白表达效率较高,为gp41疫苗的研究和血清学检测提供充足的抗原.