干扰C D147表达抑制白血病细胞SHI-1增殖及移行

目的：构建针对细胞外基质金属蛋白酶诱导因子（CD147）的慢病毒干扰载体，探讨干扰CD147表达后对白血病细胞系SHI-1细胞体外增殖、侵袭、转移能力的影响。方法设计针对CD147的干扰序列片段，构建于慢病毒载体pGCSIL-GFP上，重组慢病毒载体与包装载体共转染293T细胞，收集病毒上清，测定病毒滴度。病毒上清感染SHI-1细胞，RT-PCR法检测CD147、MMP-2及MMP-9 mRNA表达，Western blotting法检测CD147蛋白水平；MTT法检测细胞体外增殖能力，体外SHI-1细胞与骨髓基质细胞共培养跨Matrigel基质胶检测SHI-1细胞的体外侵袭能力。结果成功构建慢病毒干扰载体，获得重组慢病毒，滴度达1×109 TU/mL。病毒感染 SHI-1细胞后， SHI-1/CD147i细胞的CD147 mRNA较感染阴性对照病毒的SHI-1/NC细胞下调86．7％，CD147蛋白表达下降91％， SHI-1/CD147i细胞MMP-2及MMP-9 mRNA表达较SHI-1/NC 细胞分别下降78．3％和70．6％。SHI-1/CD147i细胞体外增殖能力较SHI-1/NC及 SHI-1细胞明显下降；与骨髓基质细胞共培养24 h 后，SHI-1、SHI-1/NC、SHI-1/CD147i细胞移行至 Transwell 下层的细胞占接种细胞数比例分别为（18．2±2．5）％、（16．5±2．7）％、（4．5±1．2）％，SHI-1/CD147细胞移行能力显著低于SHI-1和SHI-1/NC细胞。结论干扰SHI-1细胞的CD147表达后，通过下调MMPs表达抑制SHI-1细胞体内外增殖及移行能力，CD147可能成为治疗急性白血病的靶点。