表达人胰岛素前体的毕赤酵母菌株的构建

李军,陈劲春,李江, 邹保华, 吴为华, 孙悦

Journal of Beijing University of Chemical Technology（2004）

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摘要

将人胰岛素前体(HIP)基因插入到毕赤酵母Pichia pastoris的分泌表达质粒pPIC9K中,得到分泌表达质粒pPIC9K/HIP并用电转化法转化P.pastorisGS115.筛选出整合型His+Muts菌株,进一步用G418筛选获得高拷贝转化子.经诱导培养后,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)证明HIP在毕赤酵母中能有效分泌表达.对毕赤酵母中外源基因的稳定性进行了研究,结果表明外源基因在毕赤酵母中很稳定.

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