miRNA-29a调控PTEN基因表达对PC12细胞功能的影响

[目的]研究miR-29a对PC12细胞向神经细胞分化的影响,为进一步探究miR-29a生物学作用奠定基础.[方法]以PC12高分化(PC12D)细胞和PC12低分化(PC12poorD)细胞为研究对象,建立高表达miR-29a细胞模型(PC12-pLKO-miR-29a),以高表达pLKO.1-puro-vector空载的细胞(PC 12-pLKO-vector)作为对照,使用嘌呤霉素筛选稳定表达的细胞株,通过RT-PCR、细胞免疫荧光、Western blot观察:①miR-29a对PTEN干扰效率;②PTEN干扰后PC12 poorD细胞形态学改变;③PC12-pLKO-miR-29a细胞株中神经生长相关蛋白GAP-43变化.[结果] PC12D和PC12poorD细胞内均有PTEN的表达;与PC12poorD细胞相比,PC12D细胞转录的PTEN水平较低,轴突较长、GAP-43表达较高.过表达miR-29a可以降低PTEN表达,增加PC 12poorD细胞的GAP-43表达水平,促使PC 12poorD细胞突起增加、轴突伸长.[结论]miR-29a能够促进PC12细胞分化,轴突伸长,该过程同miR-29a抑制PTEN表达有关,能够为miR-29a治疗神经损伤提供研究基础.