海口市白纹伊蚊对菊酯类杀虫剂的抗药性及击倒抗性基因突变分析

目的 了解海口市白纹伊蚊对溴氰菊酯和氯菊酯的抗药性,并检测其击倒抗性(kdr)基因突变型,阐明抗性表型与kdr基因突变的关系.方法 在海口新埠岛、龙塘镇、石山镇、白沙门和花卉市场采集白纹伊蚊幼虫,应用浸渍法测定其对溴氰菊酯和氯菊酯杀虫剂的敏感性,以抗性倍数确定抗性级别.对应生物测定的样品扩增和分析白纹伊蚊的kdr基因部分片段,采用x2检验比较抗性表型与kdr突变基因型的差异性.结果 海口白纹伊蚊花卉市场和白沙门群体对溴氰菊酯和氯菊酯均产生抗性,花卉市场群体对溴氰菊酯的抗性倍数高达436.36,为高度抗性.龙塘镇和石山镇群体对氯菊酯均为敏感,对溴氰菊酯的抗性为低度(9.09)或中度(18.18).新埠岛群体对溴氰菊酯和氯菊酯均为敏感.在对应检测的317只白纹伊蚊的kdr基因中,发现1 534位点存在点突变,检测到2种突变等位基因(TGC/C、TCC/S).5种基因型和频率分别为野生型TTC/TTC(62.15％)、野生/突变型杂合子TTC/TGC(0.63％)和TTC/TCC(16.09％)、突变型纯合子TCC/TCC(20.82％)以及突变型杂合子TGC/TCC(0.32％).x2检验结果显示,接触菊酯类杀虫剂后敏感表型与抗性表型个体中,kdr基因型间的差异有统计学意义(P＜0.05),在抗性表型群体中的kdr突变型基因型的频率(42.94％)大于敏感表型个体(31.97％).结论 海口市白纹伊蚊多个群体对溴氰菊酯和氯菊酯同时存在抗性,抗性表型与kdr突变基因型密切相关.本研究首次记录了kdr新的等位基因TCC/S.