RNA干扰Tb人舌癌细胞整合素连接激酶基因表达可抑制移植瘤生长

目的 研究对Tb舌癌细胞的整合素连接激酶(ILK)进行特异性siRNA沉默后,下游信号分子Akt、GSK3β磷酸化状态及对移植瘤生长和自发性转移的变化.方法 建立特异性siILK表达载体和无同源性的对照载体,通过Lipofectamine 2000介导稳定转染人舌鳞癌Tb细胞,然后将Tb、Tb vector和Tb silk 3组细胞分别注入裸鼠皮下构建移植瘤模型,5周后检测瘤大小和质量,对裸鼠肺及瘤组织行常规病理学检查,用免疫荧光技术检测癌细胞的p-Akt和p-GSK3β等的表达,并对瘤组织内血管生成情况进行观察.结果 Tb组、Tb vector组肺组织均发现自发性转移瘤,Tb siILK组肺组织未发现自发性转移瘤;Tb siILK组移植瘤细胞形态较其他二组体积减小,核分裂相较少,核质比例缩小;Tb siILK组在体内和体外实验中的p-Akt和p-GSK3β表达较其他二组均明显下降;Tb siILK组移植瘤质量(1.68± 1.35)g较Tb组(3.58±1.04)g与Tb vector组(3.64 ±0.65)g分别降低了53.0％和53.8％(P＜0.05);Tb siILK组移植瘤血管[(5.6±2.2)/视野]生成较Tb组[(15.3±2.3)/视野]和Tb vector组[(14.6±1.4)/视野]也明显减少(P＜0.05).结论 特异性ILK表达沉默抑制Tb舌癌移植瘤的血管生成和瘤细胞增殖,可能与其抑制下游信号传导分子Akt及GSK3β的磷酸化有关,提示ILK有望成为肿瘤治疗的靶基因.