利用SMART技术构建歪头菜叶片全长cDNA文库

Pratacultural Science（2014）

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摘要

以歪头菜(Vicia unijuga)为研究材料,用Trizol试剂提取歪头菜叶片组织总RNA,用SMART TM eDNALibrary Construction Kit构建eDNA文库.经测定,初级文库滴度达到2.3×106 pfu·mL-1,扩增后文库总滴度为6.2×109 pfu· mL-1,重组率为92.7％.从扩增后的文库随机挑取16个噬菌斑进行PCR扩增鉴定,结果显示,插入片段大多分布在500～2 500 bp.用PCR法从该文库中扩增出了以往用RACE法克隆出的歪头菜木质素合成相关基因CAD 3 '端全序列.通过各项指标验证成功构建了歪头菜叶片全长eDNA文库.

关键词

full-length cDNA library,Vicia unijuga,SMART technique

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