家蚕色氨酸羟化酶(TRH)基因的克隆及表达特性分析

5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)是生物界广泛分布的信号分子,涉及动物的重要行为.5-HT是色氨酸羟化酶(Tryptophan hydroxylase,TRH)将L-色氨酸羟化为5-羟-L-色氨酸,5-羟-L-色氨酸随即被多巴脱羧酶(Aromatic L-amino acid decarboxylase,DDC)脱羧而成.TRH作为5-HT合成的限速酶,在无脊椎动物神经调控中具有重要地位.鳞翅目昆虫中TRH的功能研究并不多.在家蚕中克隆了家蚕TRH (Bombyx mori TRH,BmTRH)的cDNA序列1 667 bp,其中包含1 632 bp的开放读码框(Open reading frame,ORF).人类TPH或者果蝇TRH(Drosophila TRH,DmTRH)与BmTRH有高度相似性,尤其BmTRH和DmTRH之间大多数氨基酸保守说明它们在系统发育上的密切关系并可能有相似功能.基因表达分析显示BmTRH主要表达于头部和中枢神经组织,免疫组织化学和Western blotting结果显示BmTRH只存在于神经组织中,即BmTRH可能仅参与家蚕的神经活动.此外,家蚕DDC (B.mori decarboxylase,BmDDC)和蛋白具有TRH活性的苯丙氨酸羟化酶基因(Phenylalanine hydroxylase,BmPAH)也在中枢神经系统中有表达,暗示家蚕神经系统5-HT的合成与果蝇中不同,可能有两种不同的调控机制.