从脾虚大鼠AA-Ⅰ的排泄与脏腑oatp2a1、oatp2b1的表达探讨脾肾关系

目的 通过观察脾虚大鼠马兜铃酸(aristolochic acid,AA)代谢与肾、大肠、小肠组织中有机阴离子转运肽(organic anion transporting polypeptide,oatp)2a1、oatp2b1 mRNA及蛋白表达的关系,探讨中医学脾肾之间的相互关系.方法 46只SD大鼠随机分为空白组(1 2只)、脾虚组(22只)、AA-Ⅰ组(6只)、脾虚AA-Ⅰ组(6只).脾虚组及脾虚AA-Ⅰ组采用利血平5 mg/(kg·d)皮下注射连续1 6天造模.空白组及脾虚组选取6只大鼠行颈动脉插管,并予AA-Ⅰ灌胃后5、1 5、30、45、60 min颈动脉取血行AA-Ⅰ药代动力学检测;脾虚组选10只大鼠行肾、大肠、小肠AA-Ⅰ组织浓度测定;脾虚组及空白组各取6只分别予生理盐水灌胃,AA-Ⅰ组、脾虚AA-Ⅰ组予AA-Ⅰ灌胃后60 min时间点取肾、大肠、小肠3种组织,采用RT-PCR及Western blot方法检测各组织中oatp2a1、oatp2b1 mRNA及蛋白表达.结果 与空白组比较,脾虚组大鼠灌胃后1 5、30、45、60 min时体内AA-Ⅰ血浆浓度值明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05).脾虚组60 min时AA-Ⅰ血浆浓度下降,肾及大肠组织浓度升高,小肠中组织浓度明显下降.空白组与脾虚组中上述3种组织oatp2a1、oatp2 b1 mRNA表达无差异;与空白组比较,AA-Ⅰ组小肠oatp2 a1、oatp2b1 mRNA表达降低,大肠oatp2a1 mRNA表达降低(P ＜0.05,P＜0.01);与脾虚组比较,脾虚AA-Ⅰ组肾组织中oatp2a1、oatp2 b1 mRNA表达升高(P＜0.05),大肠组织oatp2b1mRNA表达升高(P＜0.05).结论 脾虚脾失运化状态下,AA-Ⅰ代谢差异可能与肾、大肠、小肠组织oatp2 a1、oatp2 b1表达改变相关,并提示肾、大肠在脾虚状态下物质代谢中发挥重要协调作用,验证了中医脾肾相关理论.