小鼠抗人亲环蛋白A (CypA)单克隆抗体的制备和应用

目的 原核表达人亲环蛋白A (CypA)、制备抗人亲环蛋白A(CypA)单克隆抗体(mAb)并初步探索其在结肠癌发生发展中的作用.方法 根据CypA基因序列,以原核表达系统表达CypA重组蛋白,经镍亲和层析柱纯化,免疫小鼠,杂交瘤法制备mAb;采用免疫组织化学染色法检测CypA在结直肠癌与癌旁组织中的差异表达,并分析与临床病理参数的相关性.结果 成功构建了CypA原核表达载体,获得纯化的目的蛋白;获得1株稳定分泌抗人CypA mAb的杂交瘤细胞株;研究表明,结直肠癌组织CypA阳性染色率显著增高并与肿瘤分化程度及淋巴结转移相关.结论 成功制备了小鼠抗人CypA mAb,并发现CypA在结直肠癌组织中高表达,与低分化和淋巴结转移呈正相关.