神经肽P物质及骨形态发生蛋白信号通路在ST2细胞成骨分化过程中的作用

目的 探讨神经肽P物质(SP)在ST2细胞(小鼠骨髓间充质干细胞)成骨分化过程中的作用及机制,以期为颞下颌关节骨关节炎的治疗提供依据.方法 对第3代ST2细胞分别用0、10-10、10-8、10-6、10-5 mol·L-1 SP培养,24、48、72 h后采用CCK-8实验检测细胞增殖情况.以10-6 mol·L-1 SP培养第3代ST2细胞l、3、5、7d后,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测上清液中碱性磷酸酶(ALP)、Ⅰ型胶原蛋白(Colla Ⅰ)和骨钙素(OCN)的表达,免疫荧光染色检测细胞ALP活性.分别用SP、Noggin(骨形态发生蛋白信号通路抑制剂)、SP+Noggin和2％胎牛血清培养ST2细胞,采用ELISA法检测上清液中ALP、Colla Ⅰ和OCN的表达.结果 CCK-8结果显示,24、48、72 h时均以10-6 mol·L-1SP促进ST2细胞增殖活性最为明显(P＜0.01).ELISA结果显示,ALP表达在5d时较对照组差异最为明显(P＜0.01),Colla Ⅰ和OCN的表达在7d时较对照组差异最为明显(P＜0.05);免疫荧光结果显示,ALP活性在5d时最强;加入抑制剂Noggin后,ALP、Colla Ⅰ和OCN表达量均降低.结论 SP可促进ST2细胞增殖和成骨分化,骨形态发生蛋白信号通路可能参与了此过程.