富氢液对创伤性颅脑损伤大鼠大脑皮质水通道蛋白1表达的影响

目的 探讨富氢液对大鼠创伤性颅脑损伤(TBI)后脑水肿及水通道蛋白1(AQP1)表达的影响.方法 将90只成年雄性SD大鼠按随机数字表法分为假手术(Sham)组、TBI模型组和富氢液干预组,每组30只.采用颅脑撞击法制备TBI模型;Sham组只开颅窗、骨蜡封闭缝合,不撞击.富氢液干预组于制模后经腹腔注射富氢液5 mL/kg,Sham组和TBI组注射等量生理盐水,均每日1次,共5d.各组分别于术后6、12、24、48 h和5d取6只大鼠进行神经损伤严重度评分(NSS);取大脑皮质,光镜下观察脑组织病理学变化;采用免疫组化染色,镜下观察大脑皮质AQP1阳性表达;采用实时荧光定量反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测大脑皮质AQP1 mRNA表达;采用蛋白质免疫印迹试验(Western Blot)检测大脑皮质AQP1蛋白表达.结果 ①Sham组各时间点NSS评分均为0分;TBI组NSS评分随时间延长呈升高趋势,24 h达峰值后逐渐降低;富氢液干预后可明显降低NSS评分,24 h与TBI组比较最为明显(分:9.83±2.78比13.50±2.42,P＜ 0.05).②光镜下显示,TBI组大鼠6h大脑皮质神经细胞排列即明显紊乱,24 h脑水肿和出血最为严重,之后水肿逐渐消退;各时间点软脑膜处AQP1阳性表达明显增加,以24 h时最为明显.富氢液干预组术后12h～5d脑组织病理学改变均较TBI组明显减轻;软脑膜处AQP1阳性表达较TBI组明显减少.③与Sham组比较,TBI组脑组织AQP1的mRNA和蛋白表达均随时间延长逐渐升高,并于24 h达峰值[AQP1 mRNA(2-△△Ct):7.50±0.26比1,AQP1蛋白(灰度值):1.986±0.110比0.336±0.034,均P＜0.05],之后逐渐下降;富氢液干预可明显下调脑组织AQP1的mRNA和蛋白表达[24 h AQP1 mRNA (2-△△Ct):5.40±0.21比7.50±0.26,24 h AQP1蛋白(灰度值):1.246±0.137比1.986±0.110,均P＜0.05].结论 TBI大鼠大脑皮质AQP1 mRNA和蛋白表达上调,可能参与了TBI后脑水肿的病理生理过程;早期腹腔注射富氢液可能通过下调AQP1的表达,减轻TBI后脑水肿,从而起到脑保护作用.