热休克蛋白90抑制剂17-AAG对HUT-102细胞株JAK3/STAT5信号通路的影响

目的 通过体外实验探索成人T细胞白血病(ATL)细胞内JAK/STAT信号通路的异常持续激活与HSP90蛋白的相关性.方法 使用不同浓度17-烯丙胺-17-脱甲氧格尔德霉素(17-AAG)作用于HTLV-1感染ATL细胞株HUT-102,CCK8法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,RT-PCR检测JAK3基因mRNA表达,Western blot检测JAK3、STAT5、p-STAT5、HSP90蛋白表达.结果 HUT-102细胞株内HSP90蛋白表达量显著高于正常人外周血单个核细胞(P＜0.05).17-AAG能显著抑制HUT-102细胞增殖,17-AAG的浓度在0～2 000 nmol/L时,细胞存活率随着给药浓度的提高逐渐下降,17-AAG浓度在2 000～8 000 nmol/L范围时,细胞存活率差异无统计学意义(P＞0.05).细胞凋亡实验中,未刺激组细胞凋亡率为(9.23±0.67)％,刺激组凋亡率随着17-AAG浓度增加而显著增加,浓度2 000 nmol/L时凋亡率达到(87.82±2.46)％;但在不同浓度(0、250、500、1 000 nmol/L)抑制剂刺激HUT-102细胞24 h后,JAK3 mRNA的表达无明显变化.结论 HTLV感染的ATL细胞株HUT-102细胞中,JAK3激酶作为HSP90的客体蛋白被异常活化,导致其下游信号蛋白p-STAT5异常持续性激活.17-AAG能显著下调JAK3、p-STAT5蛋白表达,抑制HUT-102细胞增殖、诱导凋亡.