IKKε蛋白在卵巢上皮性癌组织和细胞中的表达以及抑制其表达后对癌细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨卵巢上皮性癌(卵巢癌)组织和细胞中IKKε蛋白的表达,以及抑制其表达后对卵巢癌细胞增殖、凋亡的影响.方法 (1)选取2006年1月至2013年4月大连医科大学附属第一医院经手术治疗且经病理检查证实为卵巢癌的石蜡组织标本118份,患者中位年龄为59岁;另取同期因子宫肌瘤行子宫及卵巢切除术且术后经病理检查证实为正常卵巢组织标本20份作为对照,患者中位年龄为55岁.免疫组化SP法检测卵巢癌和正常卵巢组织中IKKε蛋白的表达,并分析IKKε蛋白表达与卵巢癌患者临床病理特征之间的关系.(2)选择卵巢癌细胞系SKOV3、OV2008、C13、A2780S、A2780CP、OV4、OV5、OV8和CAOV3细胞,蛋白印迹法检测卵巢癌细胞中IKKε蛋白的表达,以及IKKε抑制剂对卵巢癌细胞IKKε蛋白表达的影响;四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法和流式细胞仪分别检测IKKε抑制剂对卵巢癌细胞增殖和凋亡的影响.结果 (1)免疫组化SP法检测显示,卵巢癌、正常卵巢组织中IKKε蛋白阳性表达率分别为66.1%(78/118)、35.0%(7/20),两者比较,差异有统计学意义(χ2=6.993,P=0.008).卵巢癌组织中IKKε蛋白的表达与手术病理分期、病理分化程度、术前血清CA125水平和肿瘤分布(包括单侧卵巢、双侧卵巢)均明显相关(P<0.05),而与年龄、病理类型、发病模式分型[包括Ⅰ型(即低级别卵巢癌)、Ⅱ型(即高级别卵巢癌)]和肿瘤直径均无明显相关性(P>0.05).(2)蛋白印迹法检测显示,9种卵巢癌细胞即SKOV3、OV2008、C13、A2780S、A2780CP、OV4、OV5、OV8和CAOV3细胞中均表达IKKε蛋白,其表达强度略有差异;IKKε抑制剂(分别为0.1、0.5μmol/L)作用后,OV2008、C13、A2780S和A2780CP细胞中IKKε蛋白的表达强度分别与IKKε抑制剂作用前比较均明显减弱.MTT比色法检测显示,不同浓度(分别为0.05、0.1、0.5、1、5、10、25μmol/L)IKKε抑制剂作用后,OV2008、C13、A2780S、A2780CP和SKOV3细胞增殖的抑制率随着IKKε抑制剂浓度的增加均逐渐增高,呈明显浓度依赖性(P<0.05);其50%抑制浓度(IC50)分别为0.43、0.86、0.10、0.19、0.24μmol/L.流式细胞仪检测显示,不同浓度(分别为0.1、0.5μmol/L)IKKε抑制剂作用后,OV2008、C13、A2780S、A2780CP和SKOV3细胞凋亡率分别与IKKε抑制剂作用前比较均明显增高(P<0.05).结论 IKKε蛋白在卵巢癌组织和细胞中均呈高表达;IKKε抑制剂下调IKKε蛋白表达后可抑制卵巢癌细胞增殖并诱导卵巢癌细胞发生凋亡,提示IKKε有望成为卵巢癌分子治疗的新靶点.