连续性静脉-静脉血液滤过治疗山羊挤压综合征模型的建立

目的 建立山羊挤压综合征(CS)动物模型,并探讨连续性静脉-静脉血液滤过(CVVH)治疗对肾功能及肾组织病理变化的影响.方法 12只山羊随机分为对照组、CS模型组、CVVH治疗组,每组4只.CS模型组与CVVH治疗组山羊于后肢肌肉注射50％甘油生理盐水溶液10 mL/kg建立CS模型(对照组注射等量生理盐水),1、2、8、12、24 h后检测血清肌酸激酶(sCK)和血肌酐(sCr),以sCK＞1 000 U/L,同时sCr＞2倍对照值判断为造模成功.造模1h后,CVVH治疗组于造模对侧股静脉留置单针双腔导管建立血管通路,采用智能化床旁肾脏替代治疗机进行CVVH治疗.血流量为100 mL/min,置换液流速为35 mL/(kg·h),以前稀释法输入,治疗23 h后(第24 h)处死动物,留取肾组织标本,光镜、电镜下观察肾组织病理组织结构变化;采用免疫组化染色检查caspase12蛋白表达变化及TUNEL染色对细胞凋亡进行检测.结果 造模山羊均于注射甘油后1h内出现酱油色小便,尿量较对照组明显减少.CS模型组与CVVH治疗组造模1h后血清sCr及sCK较对照组升高,差异有统计学意义(P＜0.05),提示造模成功.行CVVH治疗23 h(第24 h),sCK、sCr水平低于CS模型组(P＜0.05).光镜下CS模型组肾组织可见急性肾小管坏死表现,肾间质水肿,肾小球基本正常.电镜下模型组可见小管上皮细胞明显的染色质聚集,线粒体肿胀,内质网扩张等早期细胞凋亡征象,CVVH治疗组表现稍轻.CS模型组及CVVH治疗组caspase12表达高于对照组(P＜0.001),CVVH治疗组caspase12表达低于CS模型组(P＜0.05).TUNEL染色证实CS模型组山羊肾组织细胞凋亡比例明显增高,CVVH治疗组较模型组凋亡比例少.结论 通过肌肉注射50％甘油生理盐水溶液可建立山羊CS模型,早期行CVVH治疗可减缓肾功能恶化,减轻肾小管上皮细胞凋亡程度.