Efecto del inhibidor lúpico o anti-factor VIII sobre la actividad del factor VIII-sustrato cromogénico

El objetivo del trabajo fue analizar el efecto de inmunoglobulinas (IgG) purificadas con actividad anti-factor VIII neutralizante o inhibidor lupico, sobre el factor VIII medido por sustrato cromogenico (factor VIIISC), con el proposito de validar el metodo para detectar anti-factor VIII en presencia de inhibidor lupico. Se aislo la fraccion IgG (cromatografia de afinidad) a partir de plasmas normales (IgG-N), con anti-factor VIII (IgG-aFVIII) o con inhibidor lupico (IgG-IL), preparandose un pool normal como aporte de factor VIII en los ensayos de inhibicion. Se analizaron las mezclas del pool normal con IgG-N, IgG-aFVIII, IgG-IL o la combinacion de IgG-aFVIII+IgG-IL, inmediatamente y luego de 2 h a 37 °C, determinandose la actividad del factor VIIISC y el indice de inhibicion inmediato (Ii) o post-incubacion (Ip). La inhibicion y la potenciacion producida por IgG-aFVIII+IgG-IL (Ii:30%±0,7; Ip:55%±2,7), fueron similares a las observadas con IgG-aFVIII sola (Ii:30%±0,6; Ip:55%±2,7). La IgG-IL no afecto la actividad de factor VIIISC. Semejante a lo observado en plasma, la IgG-IL no interfirio en la inhibicion del factor VIIISC mediada por IgG-aFVIII. Se confirmo asi la especificidad del metodo amidolitico, que permite detectar inhibidores anti-factor VIII independientemente de la coexistencia con el inhibidor lupico, solucionando el problema diagnostico planteado en hemofilia A