Cytokinins and polar transport of auxin in axillary pea buds

V teto praci byl sledovan vliv cytokininu na polarni transport auxinu v axilarnich pupenech 2 nodu sedmidennich rostlin hrachu seteho (Pisum sativum L.) cv. Vladan v průběhu jejich uvolňovani z apikalni dominance. V axilarnich pupenech dekapitovaných, přip. exogenni aplikaci benzyladeninu osetřených intaktnich rostlin byla metodou dvoukrokove, semikvantitativni RT PCR studovana exprese genů PsAUX1 (AUXIN RESISTANT 1) a PsPIN1 (PIN-FORMED 1), ktere koduji auxinove přenasece, a genů PsDRM1 (DORMANCY-ASSOCIATED PROTEIN 1) a PsAD1 (APICAL DOMINANCE 1), jejichž exprese souvisi s dormantnim, resp. korelacně inhibovaným stavem pupenů. Pro srovnani byla sledovana i exprese těchto genů v axilarnich pupenech osetřených exogenně aplikovaným auxinem. Exprese genu PsDEADbox byla použita jako vnitřni kontrola. Lokalizace PIN1 proteinu, klicoveho faktoru polarniho transportu auxinu v axilarnich pupenech, byla vizualizovana imunohistochemicky na podelných řezech axilarnim pupenem podle metodiky Paciorek et al. (2006). Objekty byly snimany laserovým konfokalnim mikroskopem TCS SP2 AOBS (Leica, Mannheim, Germany). Po exogenni aplikaci cytokininu na axilary byl prokazan rychlý vzestup exprese genů PsAUX1 a PsPIN1 se soucasným poklesem exprese genů PsDRM1 a PsAD1. Obdobne změny v expresi byly zaznamenany rovněž v axilarech dekapitovaných rostlin, byly vsak zřetelně pomalejsi. Auxinový přenasec PsPIN1 protein nebyl v axilarnich pupenech intaktnich rostlin lokalizovan polarně. Po aplikaci cytokininu doslo k postupne polarizaci PIN1 proteinu na bazi auxin transportujicich buněk. Přestože přima aplikace auxinu na axilarni pupeny intaktnich rostlin vedla rovněž ke zvýseni exprese genů PsAUX1 a PsPIN1, pupeny zůstaly inhibovany, což prokazuje přetrvavajici exprese markerů dormantniho stavu genů PsDRM1 and PsAD1. Dosažene výsledky ukazuji na možný efekt cytokininů na biosyntezu, respektive transport auxinu v axilarnich pupenech a vyzdvihuji význam vzajemných interakci auxinu a cytokininů při uvolňovani pupenů z lodyžni apikalni dominance.