低剂量脂多糖对NIT-1β细胞凋亡、增殖和分泌功能的影响

目的 观察脂多糖对小鼠胰岛NIT-1 β细胞株凋亡、增殖和分泌功能的影响。方法 以1μg/ml脂多糖孵育NIT-1细胞0～120 h,Hochest33342和膜联蛋白V/碘化丙啶染色检测细胞凋亡，CCK-8（cell counting kit-8）和5-溴脱氧尿核苷(BrdU)检测细胞增殖，放射免疫法检测细胞内胰岛素含量、胰岛素基础分泌和葡萄糖刺激的胰岛素分泌(GSIS),Western印迹检测胰岛素受体底物2(IRS-2)的酪氨酸磷酸化水平。结果 脂多糖作用120 h对细胞凋亡无明显影响。脂多糖作用24、48 h促进细胞增殖(P＜0.05或P＜0.01)；作用72 h对细胞增殖无明显影响；作用96、120 h抑制细胞增殖（均P＜0.01）。脂多糖作用48 h以后明显抑制细胞的基础胰岛素分泌（均P＜0.01），对细胞内胰岛素含量和GSIS无明显影响。脂多糖作用120 h，IRS-2的酪氨酸磷酸化水平明显下降（0.45±0.08对0.22±0.06,P＜0.05）。脂多糖作用60 min后，NF-κB抑制物(IκBα)磷酸化水平开始明显升高；IκBα磷酸化抑制剂Bay11-7082预处理1h后，脂多糖刺激的IκBα磷酸化和细胞增殖均受抑制（均P＜0.01）。结论低剂量脂多糖参与调节NIT-1细胞的增殖和胰岛素基础分泌，其机制可能与其激活NF-κB和抑制IRS-2酪氨酸磷酸化有关。