丙糖磷酸异构酶、果糖-1,6-二磷酸醛缩酶及果糖-1,6-二磷酸酶的共表达

致力于建立一条控制或降低大气中CO2浓度的途径, 选择对蓝藻进行代谢工程以便改进其光合固定CO2的效率。 作为研究的初始阶段, 将编码丙糖磷酸异构酶、果糖-1,6-二磷酸醛缩酶及果糖-1,6-二磷酸酶的3个基因构建进一个由启动子trc控制的表达质粒pTrcFAT, 成功地在大肠杆菌中实现了上述3个基因的活性共表达。 活性测定结果显示： 从1 L培养液获得的破菌上清液每分钟可以催化二羟丙酮磷酸(DHAP)转化成700 μmol果糖-6-磷酸。 在此基础上进一步构建了这3个基因共表达的大肠杆菌-蓝藻穿梭表达质粒, 也在大肠杆菌中实现了活性表达。 当外源基因的操纵子与载体质粒以大于1∶1的比例进行构建时, 可显著提高外源基因的表达量及相应的酶活性。