多发性骨髓瘤患者 DLC-1基因甲基化及三氧化二砷诱导 DLC-1基因去甲基化的研究

目的：探讨人多发性骨髓瘤（MM）肝癌缺失基因1（DLC-1）启动子区CpG岛甲基化情况，以及三氧化二砷（ As2 O3）诱导DLC-1基因的去甲基化作用。方法采用甲基特异性PCR 法（ MSP）定性检测2008至2012年来自福建医科大学附属协和医院血液内科的52例MM患者DIC基因甲基化状态，反转录（ RT）-PCR检测MM患者和人骨髓瘤U266细胞系DLC-1基因的表达情况；采用重亚硫酸盐测序PCR（ BSP）法定量检测As2 O3作用前、后人骨髓瘤细胞株U266其DLC-1基因的甲基化状态；荧光定量 PCR 检测U266细胞用药前、后DLC-1基因、DNA甲基转移酶基因（ DNMT1、DNMT3a、DNMT3b） mRNA 的表达变化。结果 MM 患者 DLC-1基因的甲基化比例为71.15％（37/52）。 U266细胞DLC-1基因呈甲基化，DLC-1基因不表达；经0.5、1.0、2.0μmol/L As2 O3作用后72 h U266细胞DLC-1基因甲基化率由95.38％下降至63.07％、30.00％及7.69％；荧光定量PCR检测经0.5、1.0、2.0μmol/L As2 O3作用后72 h U266细胞DLC-1基因mRNA表达与未加药组相比分别为其（1.60±0.09）、（3.66±0.17）、（5.29±0.15）倍，而DNMT1、DNMT3a、DNMT3b基因mRNA表达下调（均P＜0.05）。结论 DLC-1基因甲基化在MM患者中较为常见，这可能为MM的诊断和治疗提供借鉴；As2 O3可诱导DLC-1基因去甲基化，使DLC-1基因表达上调，恢复其活性，为MM去甲基化治疗提供新思路。