γδ T淋巴细胞对刀豆蛋白A诱导的肝损伤的保护作用

目的 探讨γδ T淋巴细胞对刀豆蛋白A (Con A)诱导的肝损伤的保护作用.方法 采用静脉注射Con A的方法建立小鼠急性肝损伤模型,通过监测血清ALT及细胞因子水平,评估小鼠肝脏损伤的程度.在不同的时间点处死小鼠后分离肝脏淋巴细胞,流式细胞术分析肝脏γδ T淋巴细胞的比例及其亚群比例变化情况.组间比较用t检验或单因素方差分析,P＜0.05为差异有统计学意义.结果 流式细胞分析结果表明,随着肝损伤程度的加重,小鼠肝脏γδ T淋巴细胞比例呈增高趋势.T淋巴细胞抗原受体δ-/-小鼠注射Con A后6、12、24、48、72 h的血清ALT水平分别为(6302.61±592.06) U/L、(6569.44±1060.98)U/L、(6514.29±757.26) U/L、(1262.61±558.07) U/L、(226.54±98.20) U/L,与野生型对照小鼠的(1319.26±355.48)U/L、(3415.53±343.90) U/L、(2062.73±365.67) U/L、(113.66±113.26) U/L、(42.35±21.51)U/L比较,t值分别为14.430、5.656、10.590、4.035和3.664,P值均＜0.05.同时,血清炎症因子干扰素γ、肿瘤坏死因子α及白细胞介素4在注射Con A后3h内的表达水平也迅速升高.对肝脏内γ δ T淋巴细胞两个主要亚群含量的分析结果显示,注射Con A后,Vγ4 γ δ T淋巴细胞占总γδ T淋巴细胞和肝脏总淋巴细胞的比例分别为25.26％±2.43％和0.66％±0.05％,与对照组的17.785％±2.95％和0.47％±0.07％相比,t值分别为-4.18和-5.11,P值均＜0.01；Vγl γδ T淋巴细胞占总γδ T淋巴细胞的比例为50.19％±5.52％,明显高于对照组的38.37％±6.10％(t=-3.213,P＜ 0.05),但Vγl γ δ T淋巴细胞占肝脏总淋巴细胞的比例没有明显变化(0.78％±0.25％对比0.76％±0.18％,t=-0.146,P＞0.05).回输Vγ4 γ δ T淋巴细胞组小鼠ALT水平为(5054.10±1748.51) U/L,与回输Vγ1 γδ T淋巴细胞组小鼠的(12333.56±663.54)U/L和只预先注射磷酸盐缓冲液对照组小鼠的(11904.18±1 363.46) U/L相比,差异有统计学意义(F=28.03,P＜0.01). 结论 γδ T淋巴细胞能对Con A诱导的肝损伤发挥保护作用,并且这种保护作用可能是通过Vγ4 γ δ T淋巴细胞亚群发挥作用.