多粘类芽胞杆菌SC2基因敲除体系的建立

[目的]建立多粘类芽胞杆菌SC2的基因敲除体系.[方法]利用电转化把温敏型自杀质粒pRN5101导入到多粘类芽胞杆菌SC2中.采用基因重组技术敲除SC2中的多粘菌素基因E(pmxE),得到突变株SC2-E.利用抗细菌性能检测和高效液相色谱分析合成多粘菌素的能力,来证实pmxE基因是否被敲除.[结果]成功构建了多粘类芽胞杆菌SC2的基因敲除体系.pRN5101转入SC2后能够在28℃复制,39℃自杀.突变株失去了合成多粘菌素的能力,成功敲除pmxE基因,验证了此体系的可用性.[结论]首次构建了多粘类芽胞杆菌的基因敲除体系,拓展了pRN5101的使用范围,为研究多粘类芽胞杆菌的基因功能提供了高效的遗传操作工具.