木材烟雾凝集物刺激人气道上皮细胞发生转分化样改变

目的 观察木材烟雾凝集物(WSC)对人支气管上皮细胞(HBEC)间充质转分化(EMT)样改变的影响.方法 WSC组和烟草烟雾凝集物(CSC)组分别用5、10、20、40和50 mg/L的WSC和CSC刺激HBEC 7 d,空白对照组仅用细胞培养基培养刺激HBEC 7 d,每组细胞数为1.2×106/ml.采用细胞计数试剂盒-8检测细胞总体活性.用WSC最大影响活性剂量(10 mg/L)刺激HBEC 7 d,观察细胞形态,用Western blot法和细胞免疫荧光技术检测EMT标记物E-钙黏蛋白、Ⅰ型胶原、波形蛋白和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达水平.多组间比较采用单因素方差分析,两组间比较采用t检验.结果 10 mg/L的WSC吸光度值最高(2.36 ±0.07),部分细胞形态由鹅卵石状向长梭形、多角形或星形改变,E-钙黏蛋白表达吸光度值(0.30 ±0.05)显著低于空白对照组(0.59±0.08),差异有统计学意义(F=22.07,P＜0.05),但与10 mg/L的CSC组吸光度值(0.30±0.05)比较,差异无统计学意义(F=22.07,P＞0.05)；10 mg/L的WSC组Ⅰ型胶原相对含量吸光度值(0.58±0.04)显著高于空白对照组(0.26±0.02),差异有统计学意义(F=119.72,P＜0.05),与CSC组(0.60±0.02)比较,差异无统计学意义(F=119.72,P＞0.05)；WSC组和CSC组MMP-9表达吸光度值(0.56±0.08和0.54±0.10)均显著高于空白对照组(0.19±0.03),差异均有统计学意义(F=21.79,均P＜0.05).结论 WSC能够刺激HBEC出现转分化样改变.