中华鲟半胱氨酸蛋白酶抑制剂在毕赤酵母中的表达和活性分析

Sheng wu gong cheng xue bao = Chinese journal of biotechnology(2003)

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摘要
为研究鱼类半胱氨酸蛋白酶抑制剂(Cystatin)的功能并探索其在水产加工和病害防治中的应用潜力,将PCR改造后的编码成熟肽中华鲟(Acipenser sinensis)cystatin 基因亚克隆到毕赤酵母整合型表达载体pPICZαA,氯化锂法转化毕赤酵母菌株GS115,构建表达cystatin的酵母基因工程菌.经甲醇诱导、SDS-PAGE检测培养基上清液,表明中华鲟cystatin在毕赤酵母中实现了高效表达,重组cystatin表达量约为215mg*L-1.纯化后重组蛋白纯度达94.2%.生物活性检测结果表明,1μg重组中华鲟cystatin约能抑制15μg木瓜蛋白酶的水解活性.
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