机械牵张对人肺动脉内皮细胞中细胞因子及细胞间黏附分子-1表达的影响

Zhonghua wei zhong bing ji jiu yi xue(2013)

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摘要
目的 观察机械牵张力对人肺动脉内皮细胞(HPAEC)中细胞因子及黏附分子表达的影响,为探讨呼吸机相关性肺损伤(VILI)提供理论依据.方法 采用机械牵张装置Flexcell FX-5000T对HPAEC细胞以0.5 Hz频率施加10%或20%牵张应力牵张3、6、12和24 h.应用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)、酶联免疫吸附试验(ELISA)以及蛋白质免疫印迹试验(Western blotting)检测机械牵张前后白细胞介素(IL-6、IL-8)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)等细胞因子及细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的基因和蛋白表达.结果 随牵张应力的增加,IL-8、MCP-1、ICAM-1的mRNA和蛋白表达随牵张时间的延长逐渐增加.与对照组(作为1)相比,20%牵张组牵张24 hHPAEC细胞的IL-8 mRNA表达上调至1.58±0.10,MCP-1mRNA表达上调至2.85±0.52,ICAM-1mRNA表达上调至1.90±0.14(均P<0.05).与对照组相比,20%牵张组牵张24 h HPAEC细胞的IL-8、MCP-1蛋白表达(均ng/L)显著增加(IL-8∶3401.08±439.60比1422.60±66.98,MCP-1∶1117.64±237.54比307.88±80.84,均P<0.05);ICAM-1蛋白表达上调至2.15±0.40(P<0.05);而IL-6 mRNA和蛋白水平较对照组无明显变化.结论 机械牵张可上调HPAEC细胞IL-8、MCP-1和ICAM-1的表达,这可能是机械通气致肺损伤的发病机制之一.
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