机械牵张对人肺上皮细胞转分化的影响

目的 研究周期性机械牵张刺激对人肺上皮细胞BEAS-2B向间质转分化的影响.方法 应用FX-5000T细胞牵张加载系统对BEAS-2B细胞以0.33 Hz频率分别施加10％或20％牵张应力24、48和72 h,相差显微镜下观察细胞形态变化；应用免疫荧光双标染色和实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)分别检测牵张前后E-钙黏蛋白(E-cadherin)、细胞角蛋白-8(CK-8)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和波形蛋白(Vimentin)的蛋白及mRNA表达情况.结果 ①20％病理牵张48 h后,BEAS-2B细胞开始由鹅卵圆形变为长梭形,牵张72 h细胞间隙明显增宽,细胞长梭形改变更明显.10％生理牵张下细胞形态无明显改变.②免疫荧光双标染色结果显示,20％牵张72 h时CK-8蛋白表达明显下调,E-cadherin表达明显下调,α-SMA蛋白表达明显增强.③与未牵张对照组(作为1)相比,20％牵张组E-cadherin mRNA表达在牵张48 h和72 h分别下调至0.388±0.056和0.247±0.064(均P＜0.05),CK-8 mRNA表达在牵张72 h下调至0.436 ±0.060 (P＜0.01),α-SMA mRNA表达在牵张48 h和72 h分别上调至1.437±0.267和1.261±0.247(均P＜0.05),VimentinmRNA表达在牵张48 h上调至1.679±0.172(P＜0.05).10％牵张组E-cadherin mRNA表达在牵张72 h下调至0.387±0.081(P＜0.05),Vimentin mRNA表达在牵张48 h上调至1.688±0.179(P＜0.05)；其余各指标变化不明显,差异无统计学意义.结论 持续过度牵张能诱导人肺上皮细胞BEAS-2B发生上皮向间质转分化.