视网膜母细胞瘤基因对人骨肉瘤细胞株OS732的影响

目的观察外源性N端截短的视网膜母细胞瘤(Rb)基因对骨肉瘤细胞株OS732 的生长和细胞间缝隙连接信息通讯能力的影响.方法构建N端截短的长度为1.65 kb Rb基因的真核表达质粒,并用DOTAP将其导入骨肉瘤细胞株OS732.应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Northern blot 检测Rb基因的表达;用细胞计数、流式细胞仪分析和软琼脂克隆形成试验观察OS732细胞的生长状况;用半定量RT-PCR法和罗氏黄荧光传输法检测细胞间缝隙连接信息通讯的能力.结果转染N端截短的Rb基因后,OS732细胞内可检测到内源性和外源性Rb基因的mRNA表达; OS732细胞的形态发生改变,其生长速度减慢,软琼脂形成集落能力降低,细胞周期阻滞于G0-G1期;缝隙连接蛋白基因Connexin43的表达和细胞间信息通讯能力增强.结论 N端截短的Rb基因可抑制骨肉瘤细胞株OS732的恶性生长表型以及增强细胞间信息通讯能力.