微生态水样中活的非可培养态大肠杆菌O157:H7的检测

目的 监测大肠杆菌O157∶H7在微生态汉江水中活的非可培养态；探讨荧光染色、异养平板计数和ELISA检测活的非可培养态大肠杆菌O157∶H7的可行性.方法 将大肠杆菌O157∶H7投加到模拟微生态汉江水样中,通过改变温度和营养条件,分别采用吖啶橙染色、活菌直接计数-5-氰基-2,3-二-(P-苄基-四唑氯化物)染色、活菌直接计数-萘啶酮酸染色、异养平板计数和ELISA法实时监测大肠杆菌O157∶H7的存活情况.结果 在4℃、寡营养条件下,大肠杆菌O157∶H7在汉江水中存活58 d后进入活的非可培养态,此时采用活菌直接计数-5-氰基-2,3-二-(P-苄基-四唑氯化物)染色法测得活菌数为1.2×105 CFU/ml,活菌直接计数-萘啶酮酸染色法测得活菌数为9.0×104 CFU/ml,异养平板计数法测得可培养菌数为0,ELISA法测得微生态汉江水中大肠杆菌O157∶H7总菌数在58 d内基本稳定于106 CFU/ml的初始菌数水平.结论 在4℃、寡营养条件下,大肠杆菌O157∶H7在微生态汉江水中可进入活的非可培养态；ELISA结合荧光染色、异养平板计数,能定量检出活的非可培养态大肠杆菌O157∶H7.