体外培养乙型肝炎患者骨髓间充质干细胞的生物安全性及其质量控制

目的 评价乙型肝炎患者骨髓间充质干细胞(MSCs)长期体外培养的安全性,为MSCs临床应用的质量控制提供基础.方法 采用全骨髓接种法,用无血清培养基联合成纤维生长因子体外培养乙型肝炎患者的MSCs,观察细胞形态;采用流式细胞仪检测细胞表型;对细胞悬液行细菌、病毒、内毒素及血清残留检测;T淋巴细胞抑制试验观察MSCs对T淋巴细胞增殖的抑制率;软琼脂实验观察MSCs的致瘤性,染色体核型分析MSCs遗传稳定性.组间吸光度值比较用析因设计方差分析,细胞悬液和细胞粉碎液中牛血清白蛋白含量比较用t检验.结果乙型肝炎患者的MSCs经过体外培养传代至第10代,染色体核型及表面分子表达稳定,未见细菌、病毒污染,T淋巴细胞抑制率为45%,无致瘤性.结论乙型肝炎患者的MSCs在无血清培养基中亦具有较高的增殖潜能,体外传代可以大量扩增,满足移植细胞数量需求,长期传代核型及细胞表型稳定,无致瘤性,且可抑制T淋巴细胞增殖.