CD44单克隆抗体诱导THP-1细胞分化和凋亡作用及其机制探讨

目的 观察CD44单克隆抗体A3D8对急性单核细胞白血病细胞系THP-1细胞的增殖抑制作用,并探讨其作用途径.方法 采用MTT法检测A3D8对THP-1细胞的增殖抑制效应;流式细胞术分析THP-1细胞CD33、CD15、CD11b、CD14、Annexin-V、caspase-3、细胞周期;Western blot法分析p-Akt、磷酸化细胞外调节蛋白激酶(P-ERK)、bcl-2和p27kip1蛋白的表达.结果 A3D8能显著抑制THP-1 细胞增殖,呈剂量和时间的量效关系.2.0 μg/ml A3D8作用THP-1细胞1～6 d后细胞明显分化.A3D8处理4 d,THP-1细胞CD33、CD15、CD11b、CD14表达水平与对照组比较[平均荧光强度(MFI)]分别为68.9±2.0对39.3±1.5、61.7±5.5对12.9±2.6、67.3±3.8对14.0±2.0、83.0±5.7对8.0±1.0(P均<0.01).细胞周期阻滞在G0/G1期.处理4 d实验组和对照组p-Akt、p-ERK、bcl-2蛋白分别为0.24±0.06对1.20±0.15、0.32±0,05对1.24±0.09、0.11±0.05对0.65 ±0.07,实验组较对照组显著减少(P均<0.01);处理4 d实验组和对照组p27kipl.蛋白分别为1.08±0.09对0.10±0.02,实验组较对照组显著增加(P<0.05).A3D8处理5 d THP-1细胞Annexin-V、caspase-3阳性率与对照组比较,分别为(32.5±2.5)%对(2.4±0.3)%、(33.3±2.5)%对(3.6±0.3)%(P均<0.01).结论 CD44单克隆抗体A3D8可能通过抑制PI3K/Akt和ERK1/2信号通路诱导THP-1细胞分化和凋亡.