NDRG1基因转染对HT-29人结肠癌细胞株增殖、侵袭和迁移能力的影响

Journal of Practical Oncology(2011)

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摘要
目的 研究NDRG1基因转染对HT-29人结肠癌细胞株体外增殖、侵袭和迁移能力的影响.方法 将重组真核表达质粒pEGFP-NDRG1-N3 和空载体pEGFP-N3采用阳离子脂质体Lipofectamine转染HT-29人结肠癌细胞株,通过荧光倒置显微镜检测绿色荧光蛋白的表达.免疫组织化学染色检测转染前后HT-29细胞NDRG1的表达.并通过多种体外实验(流式细胞术法、24-transwell法、扫描电镜和透射电镜等)研究NDRG1对HT-29人结肠癌细胞株体外增殖、侵袭和迁移能力及表面和超微结构的影响.结果 流式细胞术结果显示,与未转染组和转染pEGFP-N3 空载体组比较,pEGFP-NDRG1-N3组细胞生长周期G0/G1 期比例增高,S 期明显减低,差异有统计学意义( P <0.05).细胞侵袭和迁移实验的结果显示,转染pEGFP-NDRG1-N3 组细胞与空载体和空白对照组比较,穿过微孔膜的细胞数均明显减少,差异有统计学意义( P <0.05).扫描和透射电镜结果显示,转染pEGFP-NDRG1-N3 组HT-29细胞生长增殖受抑制,细胞分化程度有增高趋势.结论 NDRG1基因可明显抑制HT-29人结肠癌细胞的体外增殖活性,降低其侵袭和迁移能力,促进其分化,提示其可作为一种候选的肿瘤转移抑制基因.
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关键词
Cell cycle proteins/biosynthesis,Cell cycle proteins/genetics,Colonic neoplasms/pathology,Gene expression,Neoplasm invasiveness,Tumor cells, cultured
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