PKCα在不同转移潜能的人肺癌细胞株中的分布和激活转位变化

背景与目的 PKC是信号转导通路中发挥关键作用的蛋白激酶之一,继往对其在细胞增殖方面的作用研究较多.而对PKC在影响肿瘤的侵袭与转移方面的研究相对较少,这方面的作用机理也不清楚.本研究通过检测不同转移潜能的人高转移大细胞肺癌细胞株中PKC α亚型在胞内的分布和激活转位情况,以探讨PKC在肺癌侵袭转移中的分子机制.方法 应用Western blot方法、激光扫描共聚焦显微镜观察PKC抑制剂Calphostin C处理前后具有不同转移潜能的人高转移大细胞肺癌细胞株L9981(原代细胞株)、L9981-PLXSN(空载体细胞株)和L9981-nm23-H1(转基因细胞株)中PKC α在不同的亚细胞区域的分布、定位和激活转位变化.结果 L9981和L9981-PLXSN中PKCα主要分布在胞膜,其胞浆蛋白含量明显较L9981-nm23-H1细胞株低(P<0.001);L9981-nm23-H1细胞中PKC α主要分布在胞浆,其胞膜蛋白含量明显较L9981和L9981-PLXSN细胞低(P=0.001);激光扫描共聚焦显微镜观察L9981和L9981-PLXSN细胞中PKC α主要定位于胞核及核周,处于活性状态;L9981-nm23-H1细胞中PKC α主要定位于胞浆,处于激活转位前状态;PKC特异抑制剂Calphostin C作用后所有细胞中的PKCα均主要位于胞浆中,处于未激活状态.结论 PKC亚型的胞内分布和激活转位变化间肺癌细胞的侵袭和转移潜能密切相关.