阻断TrkB-BDNF信号传导通路对神经母细胞瘤细胞生长及凋亡的影响

目的 脑源性神经生长因子(BDNF)和其酪氨酸激酶受体B(TrkB)与神经母细胞瘤(NB)细胞的化疗耐药及恶性预后密切相关.该研究探讨阻断TrkB-BDNF信号传导通路后,NB细胞对化疗药物敏感性的变化.方法 常规培养SH-SY5Y NB细胞,用nM浓度全反式维甲酸(ATRA)诱导TrkB高表达,加人BDNF、化疗药顺铂(CDDP)和特异性酪氨酸酶抑制剂K252a处理.MIT实验方法 检测应用K252a前后细胞的存活率的变化;同时应用Western-blot方法 检测应用K252a前后TrkB的磷酸化水平的变化;流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡率;透射电镜(TEM)观察凋亡细胞的形态与结构.结果 ATRA+BDNF+CDDP组细胞的存活率及凋亡率与对照组相比,差异无显著性(P>0.05).而经K252a处理后,细胞对顺铂的敏感性增加,细胞的存活率明显降低,凋亡率明显升高,差异有显著意义.Western-blot分析显示K252a能够阻断TrkB的磷酸化.结论 阻断TrkB-BDNF信号传导通路可提高NB的化疗敏感性,逆转耐药.