精索静脉曲张大鼠附睾线粒体钙线粒体与细胞质细胞色素C含量变化及细胞的凋亡

背景:精索静脉曲张可导致男性不育,探讨其机制对治疗男性不育有着重要意义.目的:分析外科所致的精索静脉曲张对大鼠附睾细胞线粒体钙、细胞色素C含量及附睾细胞凋亡和其显微、超微结构的影响.设计:随机对照实验.材料:实验于2003-06/2004-05在佳木斯大学完成.选取青春期雄性Wistar大鼠40只,体质量(220±20)g,室温下饲养1周后,随机分为假手术组、结扎组,每组20只.方法:假手术组显露左肾静脉建立假手术模型,结扎组部分结扎左肾静脉建立精索静脉曲张模型.术后10周,取双侧附睾,检测附睾头、体部细胞线粒体钙、细胞色素C含量及细胞质细胞色素C含量.以末端脱氧核糖核酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡,常规制作附睾体部光镜、电镜标本,观察附睾组织细胞形态变化.主要观察指标:细胞线粒体钙、细胞色素C含量;细胞质细胞色素C含量;细胞凋亡;附睾组织细胞形态变化.结果:40只大鼠全部进入结果分析.①结扎组左右侧附睾细胞线粒体钙含量较假手术组显著降低[(4.72±1.45),(5.90±1.97),(10.13±2.34)mg/g,P＜0.01],②结扎组左右侧附睾细胞线粒体细胞色素C含量较假手术组线粒体组显著增高[(0.36±0.20),(0.19±0.14),(0.15±0.07)μmol/LP＜0.05].③结扎组左右侧附睾细胞胞质内细胞色素C含量较假手术组显著增高[(8.17±1.49),(7.48±1.60),(5.93±1.60)mol/L,(P＜0.05)④结扎组左右侧细胞凋亡率较假手术组显著增高[(13.3±1.9)%,(12.6±1.5)%,(6.2±0.3)%,P＜0.01].结扎组左右侧线粒体钙含量、细胞色素C、胞质细胞色素C、凋亡率差别均无显著性意义(P＞0.05).⑤光镜下主要改变有附睾管萎缩,上皮细胞出现空泡化,上皮内晕、亮细胞数明显增多.⑥电镜下主要表现为主细胞内溶酶体增多、变大,残余小体增加,内质网扩张,线粒体嵴模糊,高尔基复合体空泡化;核染色质致密,形成大小不等的团块,边集于核膜处;上皮细胞游离面微绒毛稀少,可见局灶性断裂和破坏.结论:外科所致精索静脉曲张大鼠附睾组织细胞线粒体有损伤,使线粒体丧失储钙功能,同时细胞色素C通过线粒体外膜被释放进入胞质中,导致Caspase 3激活,执行凋亡,使附睾组织细胞凋亡过度,其显微及超微结构明显改变,这些变化可能是影响精索静脉曲张患者生育能力的机制之一.