产质粒介导AmpC酶和ESBLs细菌的耐药性及β-内酰胺酶基因型研究

目的了解我院同时产质粒介导AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌与大肠埃希菌的耐药性及其β-内酰胺酶的基因型特征.方法110株临床分离无重复肺炎克雷伯菌与大肠埃希菌耐药株,采用酶提取物三维实验检测AmpC酶,美国临床实验室标准委员会(NCCLS)表型筛选和确认实验检测ESBLs;琼脂二倍稀释法测定抗生素对同时产AmpC酶和ESBLs菌株的最低抑菌浓度(MICs);等电聚焦实验测定β-内酰胺酶等电点(pIs);质粒接合实验定位耐药基因;PCR通用引物扩增AmpC酶与ESBLs基因及其序列测定以确定其基因亚型.结果同时产AmpC酶和ESBLs菌株在肺炎克雷伯菌与大肠埃希菌中的检出率分别为7.7%(5/65)、8.9%(4/45).该类产酶菌株产2～3种pI5.4～9.0 β-内酰胺酶,对第三代头孢菌素、氨曲南、头孢美唑和含酶抑制剂复合制剂的敏感性极低,但对亚胺培南均敏感.9株质粒中均检出AmpC酶基因DHA-1亚型,其中1株同时检出ACT-1亚型;ESBLs基因亚型分别为CTX-M-14、CTX-M-3、CTX-M-9,各有4、3、2株;有3株还携带广谱酶TEM-1基因.结论我院存在同时产质粒介导DHA-1、ACT-1型AmpC酶和CTX-M型ESBLs肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌流行株,药敏检测结果显示对大多数新型广谱β-内酰胺类抗生素耐药,对亚胺培南敏感.