垂体腺苷酸环化酶激活肽基因的合成表达与活性研究

Zheyu Chen,YanFeng Chai,Cheng He,ChangLin Lu,Xiangfu Wu

PROGRESS IN BIOCHEMISTRY AND BIOPHYSICS（2001）

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摘要

根据文献报道垂体腺苷酸环化酶激活肽(pituitary adenylate cyclase act ivating polypeptide, PACAP)的氨基酸序列，推导出其核苷酸序列并设计成部分互补的6条寡核苷酸片段，利用DNA合成仪人工合成、纯化这6条寡核苷酸片段，通过片段退火、连接、克隆及测序鉴定获得了PACAP基因.将PACAP基因克隆至pGEX-4T-3质粒中转化BL21进行表达分析，融合蛋白约占细胞总蛋白的30％，其中部分为可溶性，部分以包涵体形式存在.通过亲和层析纯化GST-PACAP融合蛋白，该蛋白质能促进PC12细胞轴突生长及脊髓神经元存活.

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关键词

pituitary adenylate cyclase activating polypeptide,gene cloning,gene expression,PC12 cells,spinal cord neurons

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