小鼠ob基因启动子中葡萄糖和胰岛素反应元件的鉴定
Sheng wu hua xue yu sheng wu wu li xue bao Acta biochimica et biophysica Sinica（2000）
摘要
为了解葡萄糖和胰岛素调控小鼠ob基因表达调控的机制, 应用荧光素酶报告基因、凝胶迁移率变动分析(gel mobility shift assays, GMSA)、 DNase I足迹分析和突变分析技术对小鼠ob基因启动子中葡萄糖和胰岛素反应元件(GLRE和IRE)进行了鉴定. 转染及报告基因活性分析结果显示, 在小鼠ob基因启动子-1 719～-1 452 bp之间存在负调控元件、GLRE和IRE. GMSA结果显示葡萄糖和胰岛素抑制转录因子与顺式元件结合. DNase I足迹分析和突变分析显示此结合区为AGCAAAA, 位于ob基因启动子的-1 698～-1 692 bp. 以上结果说明, 小鼠ob基因启动子-1 719～-1 452 bp之间存在小鼠ob基因表达的负调控元件, 葡萄糖和胰岛素通过同一个途径, 即通过抑制某转录因子与此顺式元件的结合促进小鼠ob基因的表达, 位于小鼠ob基因启动子-1 698～-1 692 bp的顺式作用元件AGCAAAA为一新的GLRE和IRE.
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关键词
ob gene,response element,leptin,glucose,insulin
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