白血病K562细胞XIAP表达RNAi下调对凋亡及化疗敏感性影响的研究

目的:通过RNAi下调K562细胞X染色体连锁的凋亡抑制蛋白(XIAP)的表达,观察XIAP下调后细胞凋亡及对他疗药物敏感性的变化情况.方法:K562细胞分为3组,实验组和阴性对照组分别用XIAP siRNA及阴性对照siRNA转染,空白对照组不做任何转染处理.用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测转染后各组细胞XIAP mRNA及蛋白的表达,CCK-8法检测各组细胞对阿糖胞苷和依托泊苷敏感性的变化,流式细胞仪和Hochest染色法检测各组细胞加入不同化疗药物后细胞的凋亡情况.结果:转染后18h,实验组XIAP mRNA及蛋白表达量较阴性对照组分别下降约70.0％和60.0％,P＜0.05；实验组细胞对依托泊苷和阿糖胞苷的敏感性分别提高2.77和2.28倍,P＜0.05；转染siRNA 48h后,实验组与阴性对照组、空白对照组间凋亡率差异无统计学意义,P＞0.05；转染siRNA 6h后加入依托泊苷孵育48h,实验组凋亡率(41.3±1.6)％较阴性对照组(34.3±1.9)％和空白对照组(30.6±1.7)％明显增加；加入阿糖胞苷孵育48h,实验组凋亡率(47.4±1.1)％较阴性对照组(37.0±1.8)％和空白对照组(35.5±1.7)％明显增加,P＜0.05.结论:XIAP siRNA能特异性下调K562细胞的XIAP mRNA和蛋白质水平的表达,提高K562细胞对依托泊苷和阿糖胞苷的敏感性,同时伴化疗药物诱导的细胞凋亡增强.